ISSN 0374-647 X
BOL. A. N. DE MEDICINA 2002; 80(1):
SRESÚMENES (ABSTRACTS)
DE TRABAJOS
REALIZADOS EN EL I.I.HEMA.* Y PUBLICADOS EN
REVISTAS EXTRANJERAS
Acquired von Willebrand factor abnormalities in myeloproliferative
disorders and other hematological diseases: a retrospective analysis
by a single Institution. Haematologica 2002; 87:264-70.
SÁNCHEZ-LUCEROS A.
MESCHENGIESER SS, WOODS AI, BLANCO AN, KEMPFER AC, CASAIS P, SALVIÚ
MJ, LAZZARI MA.
Departamento de Hemostasia
y Trombosis, Instituto de Investigaciones Hematológicas, "Mariano
R. Castex", Academia Nacional de Medicina.
SUMMARY
Background and Objectives.
Acquired von Willebrand syndrome (AVWS) is a rare acquired disorder.
In most cases it is associated with lymphoproliferative disorders and
monoclonal gammopathies, while less frequently myeloproliferative disorders
(MPD) are involved. Although bleeding is the most important symptom,
thrombotic complications have also been observed in cases associated
with MPD. Our aim was to review the clinical and laboratory findings
in AVWS patients from a single institution.
Design and Methods: The records of 99 patients with AVWS were reviewed
to identify the underlying diseases, the symptoms and the laboratory
parameters.
Results: In 75% of cases the AVWS was associated with MPD. The most
frequent pattern was type 2 (67.7%). Abnormalities of bleeding time,
factor VIII levels or platelet retention to glass beads were observed
in 83.8% of cases. Bleeding was present in 38.4% of patients, more frequently
in the not-MPD-associated (58.3%) vs. MPD-associated cases (32%) (p=0.022),
with a significant predominance in females, irrespective of the underlying
disease (p=0.0007). In 32% of patients with MPD, thrombotic manifestations,
mostly microvascular and arterial episodes, were observed.
Interpretation and Conclusions: AVWS in MPD seems to be mainly a laboratory
diagnosis, without clinical symptoms in most cases, although bleeding
as well as ischemic events can be present. In contrast, AVWS in not-MPD-associated
cases is most frequently associated with severe bleeding symptoms. Performing
appropriate laboratory tests may be useful for screening for AVWS.
Alteraciones adquiridas del factor von Willebrand en enfermedades mieloproliferativas
y otras enfermedades hematológicas: un análisis retrospectivo
de una institución.
RESUMEN
Antecedentes y Objetivos:
El Síndrome de von Willebrand adquirido (AVWS) es una enfermedad
rara. La mayoría de los casos han sido asociados a enfermedades
linfoproliferativas y gamapatía monoclonal, y menos frecuentemente
enfermedades mieloproliferativas (MPD). Aunque la hemorragia es el síntoma
más prevalente, en casos asociados a MPD se han observado manifestaciones
trombóticas. El objetivo del trabajo fue revisar los hallazgos
clínicos y de laboratorio de los pacientes con AVWS vistos en
una única institución.
Diseño y Métodos: Se revisaron las historias de 99 pacientes
con AVWS para establecer las enfermedades subyacentes, los síntomas
clínicos y los parámetros de laboratorio.
Resultados: El 75% de los casos de AVWS estuvo asociado a MPD. El patrón
de laboratorio más frecuente fue el tipo 2 (67.7%). Se observaron
anomalías del tiempo de sangría, niveles de FVIII y adhesividad
plaquetaria en el 83.8% de los casos. La hemorragia estuvo presente
en 38.4% de los pacientes, más frecuentemente en enfermedades
no-MPD(58.3%) vs. MPD (32%) (p=0.022), con un predominio significativo
de mujeres, independientemente de la enfermedad subyacente (p=0.0007).
En el 32% de los casos asociados a MPD hubo manifestaciones trombóticas,
especialmente microvasculares y arteriales.
Interpretación y Conclusiones: El AVWS en MPD es principalmente
un diagnóstico de laboratorio, sin síntomas clínicos
en la mayoría de los casos, aunque sangrado y eventos isquémicos
pueden presentarse. En contraste, el AVWS asociado a otras enfermedades
no-MPD se asocia más frecuentemente con sangrados, frecuentemente
severos. El uso de test de laboratorio apropiados puede ser útil
para el screening de AVWS.
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A chromogenic
substrate method for detecting and titrating anti-factor VIII antibodies
in the presence of lupus anticoagulant. Haematologica 2002; 87:271-78.
BLANCO AN, PEIRANO AA, GROSSO
SH, GENNARI LC, PÉREZ BIANCO R, LAZZARI MA.
Departamento de Hemostasia
y Trombosis, Instituto de Investigaciones Hematológicas, "Mariano
R. Castex", Academia Nacional de Medicina.
SUMMARY
Background and Objectives:
The development of neutralizing anti-factor VIII antibodies (a-fVIII)
is a major clinical complication. Lupus anticoagulant (LA) might affect
detection of a-fVIII, since both inhibitors may act on the same coagulation
pathway. Our aim was to accomplish unequivocal detection and titration
of a-fVIII even in presence of LA.
Design and Methods: We evaluated a-fVIII activity by a chromogenic substrate
(CS) method in samples with a-fVIII (n=6), LA (n=12) and presumably
both LAfVIII (n=5). The inhibition index before (Ii) and after incubation
at 37°C (Ii37) was estimated. We also performed factor VIII assays
(one-stage and CS) and titration methods (Bethesda and CS) in parallel.
Results: Inhibition in the a-fVIII group (Ii=5-3200) was potentiated
by incubation (Ii37=27-5200) as it was in LAfVIII (Ii=9-21; Ii37=50-903).
LA samples showed no or meaningless inhibitory effect (Ii=0-7; Ii37=0-4)
or a-fVIII activity (0.00-0.06 CSU/ml) by the CS method; on the contrary,
very low to moderate (0.52-7.00 BU/ml) a-fVIII activity was recorded
by the Bethesda method. The two titration methods did not correlate
(p>0.100) in the presence of LA, or LAfVIII. Differences between
factor VIII:C and factor VIIIcs were significant only in LA samples
(p=0.005); however, patients with residual factor VIII activity from
the LAfVIII group also showed higher factor VIIIcs values than factor
VIII:C ones.
Interpretation and Conclusions: Results indicate the possibility of
detecting and titrating a-fVIII without interference of LA by the CS
method. This marks a difference with respect to the Bethesda method,
in which a measurable effect can be expected in the presence of a strong
LA.
Sustrato cromogénico: un método para la detección
y titulación de anticuerpos anti factor VIII en presencia de
anticoagulante lúpico.
RESUMEN
Antecedentes y Objetivos:
El desarrollo de los inhibidores anti-Factor VIII (a-fVIII) es una complicación
clínica mayor. El anticoagulante de tipo lúpico (AL) puede
afectar la detección del a-fVIII, ya que ambos inhibidores son
capaces de actuar sobre la misma vía de la coagulación.
Nuestro propósito fue llevar a cabo la detección y titulación
inequívoca del a-fVIII aun en presencia de AL.
Diseño y Métodos: Se evaluó la actividad del a-fVIII
por el método de sustrato cromogénico (SC) en muestras
con a-fVIII (n=6), AL (n=12) y presumiblemente ambos AL+fVIII (n=5).
Se estimó el índice de inhibición antes (iI) y
después de la incubación a 37ºC (iI37). Asimismo,
se realizaron ensayos en paralelo aplicando técnicas de coagulación
y con sustrato cromogénico para la determinación de la
actividad de factor VIII (método en una etapa y SC) y la titulación
del inhibidor a-fVIII (Bethesda y SC).
Resultados: La inhibición en el grupo a-fVIII (iI=5-2300) se
potenció por efecto de la incubación (iI37=27-2500), como
así también en los LA+fVIII (iI= 9-21; iI37=50-903). Las
muestras AL mostraron poco o ningún efecto inhibitorio (iI= 0-7;
iI37=0-4) o actividad a-fVIII (0.00-0.06 USC/ml) por el método
de sustrato cromogénico; por el contrario por el método
Bethesda se encontró muy baja a moderada actividad a-fVIII (0.52-7.00
UB/ml). En presencia de AL o AL+fVIII, ambos métodos de titulación
no mostraron correlación (p>0.100). Las diferencias entre
el factor VIII:C y el factor VIIISC fueron significativas sólo
en las muestras con AL (p=0.005); no obstante, los pacientes con actividad
de factor VIII residual del grupo LA+fVIII, también mostraron
valores de factor VIIISC más elevados que los determinados por
el método de coagulación (VIII:C).
Interpretación y Conclusiones: Los resultados indican la posibilidad
de detectar y titular los inhibidores a-fVIII, sin interferencia de
AL, aplicando el método de sustrato cromogénico. Esto
marca una diferencia respecto del método Bethesda, en el cual
ante la presencia de un AL potente, es dable esperar un efecto de interferencia
medible, que se traduciría en un resultado falsamente positivo
o aumentado.
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Interleukin-1beta
induces in vivo tolerance to lipopolysaccharide in mice. Clin Exp
Immunol 2002; 128:221-8.
ALVES-ROSA F, VULCANO M,
BEIGIER-BOMPADRE M, FERNÁNDEZ G, PALERMO M, ISTURIZ MA.
División Inmunología,
Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex",
Academia Nacional de Medicina.
SUMMARY
Endotoxin or lipopolysaccharide
(LPS) tolerance may be partially due to the secretion of potent anti-inflammatory
cytokines following severe Gram-negative infections, or by low doses
of LPS. In this work, we describe the effects of interleukin-1 (IL-1)
and tumour necrosis factor alpha (TNF-), two early cytokines secreted
after LPS exposure, in the induction of LPS tolerance. Our results demonstrate
that mice treated with three daily doses of 100 ng of IL-1 were tolerant
to LPS-induced shock. However, TNF- was unable to induce an LPS refractory
state. Given the fact that 100 ng of IL-1 increase the plasma levels
of glucocorticoids, we evaluated whether a daily injection of dexamethasone
(DEX) alone was able to reproduce the LPS-like tolerant state. However,
no signs of LPS refractoriness were detected, except when DEX was administered
concomitantly with a dose of IL-1 that does not induce corticosterone
secretion (12 ng/mouse). This dose was found to induce in vitro up-regulation
of the glucocorticoid receptors (GcR) of peritoneal macrophages following
24 h of treatment. In addition, we demonstrate that IL-1 is capable
of inducing the down-regulation of Toll-like receptor 4 (TLR4), a crucial
molecule in the signal transduction of LPS. Taken together, our results
indicate that IL-1 can generate tolerance to LPS in vivo, and suggest
that the regulation of mechanisms of the down-regulation of TLR4, as
well as those involved in the expression of GcR and/or in the secretion
of glucocorticoids, would be crucial for these effects.
Interleuquina-1beta induce tolerancia a lipopolisacáridos en
ratones.
RESUMEN
La tolerancia a endotoxinas
o lipopolisacáridos (LPS) se debe parcialmente a la secreción
de citoquinas anti-inflamatorias muy potentes, que se liberan en el
curso de las infecciones mediadas por bacterias Gram-negativas o por
la estimulación con bajas dosis de LPS. En este trabajo nosotros
describimos el efecto de la interleuquina-1 (IL-1 ) y el factor de necrosis
tumoral alfa (TNF- ), dos citoquinas que se secretan tempranamente en
respuesta a la exposición a LPS, en la inducción de la
tolerancia a lipopolisacáridos. Nuestros resultados demuestran
que los animales tratados con tres dosis diarias de 100 ng de IL-1 fueron
tolerantes a una dosis de LPS capaz de inducir shock séptico.
Dado que 100 ng de IL-1 induce un aumento de los niveles plasmáticos
de glucocorticoides, evaluamos el efecto de la inoculación diaria
de dexametasona (DEX) sobre la tolerancia a LPS. Los resultados obtenidos
indicaron que DEX no origina refractariedad a LPS, excepto cuando DEX
es administrada en forma conjunta con una dosis de IL-1 de 12 ng/ratón
(dosis no inductora de la secreción de corticosterona). Se encontró
que IL-1 12 ng/ratón induce in vitro la sobreexpresión
(up-regulation) de los receptores para glucocorticoides (GcR) en macrófagos
peritoneales de ratón luego de 24 h de tratamiento. Además,
demostramos que la IL-1 es capaz de inducir una disminución (down-regulation)
de la expresión del Toll-like receptor 4 (TLR4), una molécula
de suma importancia en la transducción de señales mediadas
por LPS. Todos estos datos indican que la IL-1 es capaz de generar tolerancia
a LPS in vivo, y sugieren que: la regulación de los mecanismos
de down-regulation del TLR4, y la de aquellos mecanismos involucrados
en la expresión de los GcR y/ o en la secreción de glucorticoides,
serían cruciales para la inducción de refractariedad a
LPS.
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Evaluation
of constitutional chromosome aberrations in hematologic disorders.
Cancer Genet Cytogenet 2002; 134:133-7.
CERRETINI R, ACEVEDO S, CHENA
C, BELLI C, LARRIPA I, SLAVUTSKY I.
Departamento de Genética,
Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex",
Academia Nacional de Medicina.
SUMMARY
We have reviewed 4164 patients
with various hematologic disorders cytogenetically studied in our laboratory
during the last 25 years to analyze the frequency of constitutional
chromosome aberrations (CCA) and to evaluate their association with
hematologic malignancies. Our population of patients included 1133 pediatric
patients and 3031 adults. Twenty-four (0.58%) cases showed CCA. They
included four patients with Robertsonian translocations, one patient
with a balanced translocation, two patients with sex chromosome abnormalities,
and 17 cases with Down syndrome (DS). Non-significant differences among
the frequency of patients with CCA from our hematologic series and those
observed in the two largest combined surveys of livebirth published
(0.65-0.84%) were found. The incidence of DS patients in our population
(0.41%) was approximately three times higher than of that observed at
birth (0.12-0.17%; P<0.001). The total incidence of constitutional
chromosome abnormalities in the non-DS hematologic patients was 0.168%
(7 of 4164) lower than of that observed in the newborn population (0.51-0.67%;
P<0.001). Non-significant differences were found when the incidences
of structural aberrations and sex chromosome anomalies were individually
compared with the data of the overall population. Our results suggest
that the presence of a CCA, other than DS, would not predispose patients
to hematologic malignancies.
Evaluación de aberraciones cromosómicas constitucionales
en desórdenes hematológicos.
RESUMEN
Hemos revisado 4164 pacientes
estudiados en nuestro laboratorio con diversos desórdenes hematológicos,
ingresados durante los últimos 25 años, para analizar
la frecuencia de aberraciones cromosómicas constitucionales (ACC)
y evaluar su asociación con neoplasias hematológicas.
Nuestra población de pacientes incluyó 1133 pacientes
pediátricos y 3031 adultos. Veinticuatro (0,58%) tenían
ACC. Ellos incluyen 4 pacientes con translocaciones Robertsonianas,
un paciente con una translocación balanceada, dos pacientes con
anormalidades de los cromosomas sexuales y 17 casos con Síndrome
de Down (SD). No se observaron diferencias significativas entre la frecuencia
de pacientes con ACC dentro de nuestra población hematológica
y aquellos observados en dos grandes series de recién nacidos
publicados (0,65%-0,84%). La incidencia de SD en nuestra población
(0,41%) fue aproximadamente tres veces mayor que la observada al nacimiento
(0,12-0,17%; P 0,001). La total incidencia de aberraciones cromosómicas
constitucionales en los pacientes hematológicos sin SD fue 0,168%
(7 de 4164) más baja que la observada en la población
de recién nacidos (0,51-0,67%, P 0,001). No se encontraron diferencias
significativas cuando la incidencia de aberraciones estructurales fueron
individualmente comparadas con los datos de la total población.
Nuestros resultados sugieren que la presencia de ACC, diferentes a las
de SD, no predispondrían a neoplasias hematológicas.
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Correlation
between chromosome damage and apoptosis induced by fludarabine and idarubicin
in normal human lymphocytes. Toxicology 2002; 171:215-22.
GONZÁLEZ-CID M, FUNDIA
AF, CUELLO MT, LARRIPA I.
Departamento de Genética,
Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex",
Academia Nacional de Medicina
SUMMARY
Fludarabine (FLU, a fluorinated
purine analog) and idarubicin (IDA, a DNA-topoisomerase II poison) are
frequently used in cancer chemotherapy. The effects of these drugs on
cultured normal human lymphocytes were studied to establish the possible
involvement of chromosome damage in the apoptotic program. Chromosome
aberrations (CA) were evaluated in first division metaphases and the
apoptotic process was measured by morphological and electrophoretical
techniques. The percentage of abnormal cells was increased from the
doses of FLU 1.0 microg/ml and IDA 0.005 microg/ml (P<0.0001) with
an important decrease in the mitotic index (MI) for the highest doses
assayed. A significant dose-dependent induction of abnormal cells was
observed for both drugs. An increase of apoptotic cells was found at
5.0 and 10.0 microg/ml of FLU (P<0.001) while IDA activated apoptosis
at 0.05 microg/ml (P<0.01) and markedly from 0.1 microg/ml (P<0.001).
These increments were dose dependent. Apoptotic cell morphology was
associated with DNA fragmentation at the highest doses. The increased
induction of abnormal cells and the decreased MI were in correlation
with the apoptotic index for FLU and IDA, suggesting the role of CA
in drug-induced cell death.
Correlación entre daño cromosómico y apoptosis
inducido por Fludarabine e Idarubicina en linfocitos humanos normales.
RESUMEN
Fludarabine (FLU, un análogo
de purina fluorinado) e Idarrubicina (IDA, un veneno de DNA-topoisomerasa
II) son frecuentemente usados en quimioterapia del cáncer. Los
efectos de estas drogas sobre cultivo de linfocitos humanos se estudiaron
para determinar la relación entre el daño cromosómico
y el programa apoptótico. Las aberraciones cromosómicas
(AC) se evaluaron en metafases en primera división y el proceso
apoptótico se midió por morfología y electroforesis.
El porcentaje de células anormales se incrementó a partir
de 1 ug/ml de FLU y 0,005 ug/ml de IDA (P<0.0001) con una importante
disminución del índice mitótico (IM) en las dosis
más altas ensayadas. Una significativa inducción de células
anormales dependiente de la dosis se observó con ambas drogas.
Un aumento de células apoptóticas se observó a
5 y 10 ug/ml de FLU (P<0.001), mientras que IDA activó la
apoptosis a partir de 0.05 ug/ml (P<0.01) y muy marcadamente a 0.1
ug/ml (P<0.001). Estos incrementos fueron dosis dependientes. La
morfología celular apoptótica se asoció con fragmentación
del ADN a altas dosis. La inducción aumentada de células
anormales y la disminución del IM estuvieron en correlación
con el índice de apoptosis inducido por FLU e IDA, sugiriendo
el rol de las AC en la muerte celular inducida por drogas.
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Differential
antigenotoxic and cytoprotective effect of amifostine in idarubicin-treated
mice. Environ Mol Mutagen 2002; 39:3-9.
DE CAMPOS NEBEL M, LARRIPA
I, GONZALEZ-CID M.
Departamento de Genética,
Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex",
Academia Nacional de Medicina.
SUMMARY
In this study we evaluated
the antigenotoxic and cytoprotective capabilities of WR-2721 [S-2-(3-aminopropylamino)-ethylphosphorothioic
acid (amifostine)] in different normal tissues of BALB/c mice treated
with idarubicin [4-demethoxydaunorubicin (IDA)]. The aminothiol WR-2721
is a pro-drug that requires dephosphorylation to its active metabolite
WR-1065, to produce selectively cytoprotective activity in normal tissues
exposed to radio- and chemotherapeutic agents, without protecting malignant
tissues. IDA is an effective chemotherapeutic agent against hematological
diseases, but produces a broad spectrum of toxicity in nontumoral cells.
Animals were injected intravenously with WR-2721 (250 mg/kg) or IDA
(6 mg/kg) and WR-2721/IDA. Micronuclei frequency in bone marrow was
measured 24 and 48 hr after initiation of the treatments. The IDA-treated
group showed increased levels of micronuclei. However, the WR-2721-
and WR-2721/IDA-treated groups did not show differences from the controls.
Genetic damage was evaluated by alkaline single-cell gel electrophoresis
at 24-hr posttreatments. Important DNA damage was observed in liver,
spleen, and peripheral blood cells of mice treated with IDA. The presence
of WR-2721 diminished that damaging effect only in liver cells. The
apoptotic index was measured in liver and spleen tissues by the TUNEL
assay 14 and 24 hr after treatment. In liver we observed an increased
percentage of apoptotic cells at 24 hr for the IDA-treated group, whereas
the WR-2721 and WR-2721/IDA groups remained at low levels. Splenic cells
treated with IDA and WR-2721/IDA showed increased DNA fragmentation
levels at any time. In conclusion, WR-2721 has a tissue-specific antigenotoxic
and cytoprotective effect in IDA-treated mice using these experimental
conditions. Copyright 2002 Wiley-Liss, Inc.
Efecto antigenotóxico y citoprotector diferencial de amifostina
en ratones tratados con idarubicina.
RESUMEN
En este estudio nosotros
evaluamos los efectos antigenotóxicos y citoprotectores de WR-2721
[ácido S-2-(3-aminopropilamino)-etilfosforotioico (amifostina)]
en diferentes tejidos de ratones BALB/c tratados con idarubicina [4-demetoxidaunorubicina
(IDA)]. El aminotiol WR-2721 es una prodroga que requiere ser defosforilada
para formar el metabolito activo WR-1065 el cual produce citoprotección
selectiva en tejidos normales expuestos a agentes radio y quimioterapéuticos
sin proteger al tejido tumoral. IDA es un agente quimioterapéutico
efectivo frente a enfermedades hematológicas, pero produce un
amplio espectro de toxicidad en las células no tumorales. Los
animales fueron inyectados en forma intravenosa con WR-2721 (250 mg/kg),
IDA (6 mg/kg) o WR-2721/IDA. La frecuencia de micronúcleos en
médula ósea fue medida 24 y 48 h luego del inicio de los
tratamientos. El grupo tratado con IDA mostró niveles incrementados
de micronúcleos. Sin embargo, los grupos tratados con WR-2721
y WR-2721/IDA no mostraron diferencias respecto a los controles. Por
otra parte, el daño genético inducido fue evaluado mediante
electroforesis alcalina en gel de células individuales a las
24 h de iniciados los tratamientos. Se observó un importante
daño genético inducido en hígado, bazo y en células
de sangre periférica en los ratones tratados con IDA. La presencia
de WR-2721 disminuyó el daño solo en células hepáticas.
El índice apoptótico fue medido en tejido esplénico
y hepático por el ensayo TUNEL a las 14 y 24 h de iniciados los
tratamientos. En hígado observamos un incremento en el porcentaje
de células apoptóticas a las 24 h en el grupo de tratamiento
IDA, mientras que los grupos tratados con WR-2721 y WR-2721/IDA permanecieron
a niveles bajos. Las células esplénicas tratadas con IDA
o WR-2721 mostraron niveles de fragmentación del ADN elevados
a los tiempos analizados. En conclusión, WR-2721 produce un efecto
antigenotóxico y citoprotector específico de tejido en
ratones tratados con IDA en las condiciones experimentales utilizadas.
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Detection
of risk groups in myelodysplastic syndromes. A multicenter study.
Haematologica 2002; 87:9-16.
BELLI C, ACEVEDO S, BENGIO
R, ARROSSAGARAY G, WATMAN N, ROSSI N, GARCIA J, FLORES G, GOLDZTEIN
S, LARRIPA I.
Departamento de Genética,
Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex",
Academia Nacional de Medicina.
SUMMARY
Background and Objectives:
Myelodysplastic syndromes (MDS) comprise a group of heterogeneous hematologic
disorders with risk of leukemic evolution (LE). The French-American-British
(FAB) co-operative group classifies them into five morphologic entities
and the International Prognostic Scoring System (IPSS) proposes four
groups of risk on the basis of clinical and cytogenetic variables. The
aim of this study was to evaluate the application of the IPSS in our
Argentine population, to test the prognostic value of its variables
and to determine whether this score helps to associate prognostic subgroups
of risk into FAB subtypes.
Design and Methods: Two hundred and thirty-four patients with primary
MDS and a median follow-up of 28 months were evaluated using univariate
analyses to determine median survival (SV) and the time to LE. The variables
analyzed were FAB classification, IPSS, percentage of myeloblasts, cytogenetic
groups of risk and number of cytopenias.
Results: Univariate analyses showed that all variables analyzed were
predictive for SV and for LE in our MDS population. Application of the
IPSS allowed discrimination into the 4 groups of risk and helped to
identify prognostic subclasses among the FAB classification, associating
5%, 15% and 19% of cases with worse prognosis within the FAB classification
of refractory anemia (RA), RA with ringed sideroblasts and RA with excess
of blasts (RAEB), respectively. The IPSS was not informative for RAEB
in transformation cases and would not be applied to patients with chronic
myelomonocytic leukemia.
Interpretation and Conclusions: This score could be applied to our MDS
population, showing no geographic differences. Stratification of FAB
patients according to IPSS would be helpful to develop risk-adapted
therapeutic strategies.
Detección de grupos
de riesgo en Síndromes Mielodisplásicos. Estudio multicéntrico.
RESUMEN
Antecedentes y Objetivos:
Los Síndromes Mielodisplásicos (SMD) comprenden un grupo
heterogéneo de desórdenes hematológicos con riesgo
de evolución leucémica (EL). El grupo cooperativo Francés-Americano-Británico
(FAB) los clasifica en cinco entidades morfológicas y el International
Prognostic Scoring System (IPSS) propone cuatro grupos de riesgo teniendo
en cuenta variables clínicas y hallazgos citogenéticos.
El objeto del presente estudio fue evaluar la aplicación del
IPSS en nuestra población Argentina, analizar el valor pronóstico
de sus variables y determinar si dicho sistema es útil para asociar
subgrupos de riesgo dentro de los subtipos FAB.
Diseño y Métodos: Doscientos treinta y cuatro pacientes
con SMD primario, con una mediana de seguimiento de 28 meses, fueron
evaluados utilizando análisis univariados a fin de determinar
la media de Sobrevida (SV) y el tiempo de EL. Las variables analizadas
fueron la clasificación FAB, IPSS, porcentaje de blastos, grupos
de riesgo citogenético y número de citopenias.
Resultados: Los análisis univariados mostraron que todas las
variables analizadas fueron predictivas para SV y EL en nuestra población
con SMD. La aplicación del IPSS permitió la discriminación
de los 4 grupos de riesgo y ayudó a identificar subclases pronósticas
dentro de la clasificación FAB, asociando 5%, 15% y 19% de casos
con peor pronóstico dentro de los grupos FAB anemia refractaria
(AR), AR con sideroblastos en anillo y AR con exceso de blastos (AREB),
respectivamente. El IPSS no fue informativo para los casos de AREB en
transformación y no debería ser aplicado a pacientes con
leucemia mielomonocítica crónica.
Interpretación y Conclusiones: El presente sistema puede ser
aplicado en nuestra población debido a que no presenta diferencias
geográficas. La estratificación de los pacientes, previamente
clasificados según FAB, de acuerdo al IPSS podría ser
útil para desarrollar estrategias terapéuticas relacionadas
a riesgo.
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Decreased
recovery of replication-competent HIV-1 from peripheral blood mononuclear
cell-derived monocyte/macrophages of HIV-positive patients after 3 years
on highly active antiretroviral therapy. AIDS 2002; 16:1289-92.
BELMONTE L, BARÉ P,
PICCHIO GR, PÉREZ BIANCO R, DE TEZANOS PINTO M, CORTI M, VILLAFAÑE
MF, DE BRACCO MM, RUIBAL-ARES BH.
División Inmunología,
Dpto. Medicina Transfusional y Hemofilia, Instituto de Investigaciones
Hematológicas "Mariano R. Castex", Academia Nacional
de Medicina.
SUMMARY
We studied the release of
p24 antigen from peripheral blood mononuclear cell-derived monocyte/macrophages
obtained from 13 HIV-positive patients receiving highly active antiretroviral
therapy (HAART). Although HIV-infected monocyte/macrophages were detected
in 80% of patients after 36 months of continuous treatment, additional
exposure to HAART reduced the chance of detecting HIV-releasing monocyte/macrophages.
Therefore, after more than 3 years of HAART, recently infected monocytes
may play a less important role as a source of emerging HIV-1 upon HAART
interruption.
Disminución en la
recuperación de HIV-1 replicativo proveniente de monocitos/macrófagos
derivados de células mononucleares periféricas de pacientes
HIV positivo después de 3 años con terapia antirretroviral
de alta eficacia (HAART).
RESUMEN
Se estudió la liberación
del antígeno p24 de monocitos/macrófagos derivados de
células mononucleares periféricas obtenidas de 13 pacientes
HIV positivos que recibían terapia antirretroviral de alta eficacia
(HAART). Se detectaron monocitos/macrófagos infectados con HIV
en el 80% de los pacientes luego de 36 meses de tratamiento continuo;
sin embargo, una exposición adicional al HAART reduce significativamente
la posibilidad de detectar monocitos/macrófagos infectados con
HIV. Por lo tanto, después de 3 años de HAART, monocitos
recientemente infectados jugarían un rol menos importante como
fuente de HIV-1 emergente luego de la interrupción del HAART.
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CD34 and
CD117 are over-expressed in AML and may be valuable to detect minimal
residual disease. Leuk Res 2002; 26:615-9.
SCOLNIK MP, MORILLA R, DE
BRACCO MM, CATOVSKY D, MATUTES E.
División Inmunología
Oncológica, Departamento de Inmunología y Medicina Experimental,
Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex",
Academia Nacional de Medicina.
SUMMARY
We estimated by quantitative
flow cytometry (FC) the expression of CD13, CD33, CD34 and CD117 antigens
in cells from 64 patients with acute myeloid leukaemia (AML) and 22
normal bone marrows (BMs). The method converts fluorescence intensity
into number of antigen molecules per cell, measured by antibody binding
capacity (ABC). The number of molecules per cell in normal BM was 9.5+/-5.7
for CD13, 7+/-2.3 for CD33, 6+/-0.7 for CD34, and 6.3+/-1.5x10(3) for
CD117. AML blasts expressed 11.4+/-12.4 molecules per cell for CD13,
9.5+/-9.7 for CD33, 74+/-2328.5 for CD34 and 12.5+/-33x10(3) for CD117.
The number of CD34 and CD117 molecules were significantly higher in
AML than in normal (P<0.0001 and P<0.05, respectively) while only
in a few cases, CD13 and CD33 were abnormally expressed in myeloblasts.
Our results indicate that quantitative analysis of CD34 and CD117 may
be useful to detect minimal residual disease (MRD) and could be tested
in a future to monitor therapy in AML.
La sobreexpresión de CD34 y CD117 en LMA puede ser de utilidad
para la detección de enfermedad mínima residual.
RESUMEN
Nosotros estimamos por citometría
de flujo (CF) la expresión de los antígenos CD13, CD33,
CD34 y CD117 en células blásticas de 64 patients con leucemia
mieloblástica aguda (LMA) y 22 médulas óseas normales
(BMs). El método convierte la intensidad de fluorescencia en
número de moléculas por célula, expresado como
capacidad de unión al anticuerpo (ABC). El número de moléculas
por célula en médula ósea normal resultó
de 9.5+/-5.7 para el CD13, 7+/-2.3 para el CD33, 6+/-0.7 para el CD34
y 6.3+/-1.5x10(3) para el CD117. Los blastos de LMA expresaron 11.4+/-12.4
moléculas por célula para CD13, 9.5+/-9.7 para el CD33,
74+/-2328.5 para el CD34 y 12.5+/-33x10(3) para el CD117. El número
de moléculas de CD34 y CD117 resultó significativamente
elevado en LMA comparado con los normales (P<0.0001 y P<0.05,
respectivamente); sólo en algunos casos la expresión de
CD13 y CD33 resultó anormal en mieloblastos. Nuestros resultados
indican que el análisis cuantitativo de CD34 y CD117 puede ser
útil para la detección de enfermedad mínima residual
y puede ser testeado en un futuro para el monitoreo de la terapia en
LMA.
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Immune
complexes and apoptosis in B-cell chronic lymphocytic leukemia.
Leuk Lymphoma 2002; 43:251-5.
GAMBERALE R, GEFFNER JR,
GIORDANO M.
División Inmunología,
Departamento Inmunología y Medicina Experimental, Instituto de
Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex",
Academia Nacional de Medicina.
SUMMARY
The progressive accumulation
of B-cell chronic lymphocytic leukemia (B-CLL) cells in vivo is attributed
to resistance to apoptosis, although this can be modulated in vitro
by a variety of cellular and humoral factors (cell-cell, cell-matrix
interactions, cytokines). We have previously reported that IgG immune
complexes (IC) delay B-CLL cell apoptosis through a paracrine mechanism,
which depends on monocytes and NK cells. On the other hand, despite
the fact that IC effectively bind to type II Fc gammaRs expressed on
B-CLL cells, they are unable to deliver transmembrane signals. We speculate
that this lack of responsiveness of resting B-CLL cells to IC could
be overcome by activation. The analysis of this possibility would be
relevant since the presence of circulating IC is a common feature in
B-CLL patients.
Complejos Inmunes y apoptosis en Leucemia Linfática Crónica
de Células B.
La progresiva acumulación
in vivo de las células B de leucemia linfática crónica
(LLC-B) se atribuye a una resistencia a morir por apoptosis, a pesar
de que su sobrevida puede ser regulada in vitro por una variedad de
factores humorales y celulares (interacciones célula-célula,
célula-matriz extracelular, citoquinas). Hemos reportado previamente
que los complejos inmunes con IgG (CI) retardan la apoptosis de las
células leucémicas a través de un mecanismo paracrino
dependiente de monocitos y células NK. Por otro lado, a pesar
de que los CI se asocian efectivamente a los receptores para el fragmento
Fc de la IgG (RFc ) que expresan las células leucémicas,
ellos son incapaces de transducir señales. Especulamos que la
falta de respuesta de las células B de LLC-B a los CI en ausencia
de un estímulo particular podría ser modificada por la
activación celular. El análisis de esta posibilidad podría
ser relevante ya que la presencia de CI circulantes es una característica
común en los pacientes con LLC-B.
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The CpG
island in intron 22 of the factor VIII gene is predominantly methylated
on the X chromosome of human males. J Hum Genet 2002; 47:239-42.
DE BRASI CD, BOWEN DJ, COLLINS
PW, LARRIPA IB.
Departamento de Genética,
Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex",
Academia Nacional de Medicina.
SUMMARY
The inactivation of one of
the two X chromosomes in females is a random process associated with
methylation principally in CpG islands. The methylation status of a
CpG island in intron 22 of the human factor VIII (FVIII) gene was investigated
using a novel practical approach. Genomic DNA from men and women was
digested with various methylation-sensitive (MS) restriction enzymes,
the recognition sequences of which occurred at least once in the FVIII
CpG island. Long distance-polymerase chain reaction (LD-PCR) was then
used to amplify the island. Successful amplification indicated that
the island was methylated and the absence of a PCR product indicated
that at least one restriction site was unmethylated. To analyze the
relative methylation status of the extragenic and intragenic copies
of the island, we used Southern blot with MS restriction enzymes. The
MS LD-PCR patterns obtained from male and female DNA samples indicated
that at least some copies of the intragenic CG island were fully methylated
at all sites investigated. Additionally, the island showed consistent
differences among individuals. Southern blot studies using female DNA
showed partial resistance to MS digestion for the intragenic and extragenic
CpG island homologs. Our observations indicate that this CpG island
is predominantly methylated on the X chromosome of males and suggest
that its methylation pattern does not correlate with X inactivation
of females. This prevents the use of this island coupled with DNA polymorphisms
for investigation of X-chromosome inactivation.
La isla CpG del intrón 22 del gen del factor VIII está
predominantemente metilada en el cromosoma X de varones.
RESUMEN
La Inactivación de
uno de los dos cromosomas X de las mujeres es un proceso al azar asociado
a la metilación sobre islas CpG. Fue investigado el estado de
metilación de la isla CpG del intrón 22 del gen del factor
VIII humano usando un nuevo abordaje práctico. DNA genómico
de hombres y mujeres fue digerido con varias enzimas sensibles a metilación
(MS) cuyas secuencias de reconocimiento ocurrían al menos una
vez en la isla CpG. Después el digesto fue amplificado por PCR
de larga distancia (LD-PCR). La presencia de amplificación indica
que la isla está completamente metilada mientras que la ausencia
de productos señala que al menos un sitio está demetilado.
Para el análisis del estado de metilación relativo de
las copias intra y extragénicas de la isla CpG se utilizó
la técnica de Southern blot con enzimas de restricción
MS. Los patrones obtenidos en muestras de DNA de varones y mujeres indicaron
que al menos algunas copias de la isla CpG intragénicas estaban
completamente metiladas en todos los sitios investigados. Además,
el estado de metilación de la isla mostró consistentes
diferencias entre individuos. Los estudios de Southern blot sobre DNA
de mujeres señalaron resistencia parcial a la digestión
con MS para los homólogos intra y extragénicos de la isla
CpG. Nuestras observaciones indican que esta isla CpG está predominantemente
metilada en el cromosoma X de los varones y sugieren que este patrón
de metilación no se correlaciona con el estado de inactivación
del cromosoma X en mujeres. Este hecho excluye a esta isla CpG, en acoplamiento
a sus polimorfismos ligados, para los estudios de la inactivación
del cromosoma X.
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Prevalence
of hepatitis G virus infection in a cohort of hemophilic HIV positive
patients. Medicina (Bs. Aires) 2002; 62:173-5.
MASSUD I, CORTI M, DE TEZANOS
PINTO M, PÉREZ BIANCO R, PICCHIO G, BARÉ P.
Departamento de Medicina
Transfusional y Hemofilia, Instituto de Investigaciones Hematológicas
"Mariano R. Castex", Academia Nacional de Medicina.
SUMMARY
We analyzed the prevalence
of hepatitis G virus (HGV) infection in HCV+/HIV+ hemophilic patients
determining HGV viremia in plasma by polymerase chain reaction (PCR).
The overall prevalence of HGV infection was 13.51%. Viremia by HGV was
more frequent in younger patients. Two subgroups of patients were considered
taking into account prognosis of HIV disease progression. The prevalence
of HGV infection was significantly higher in those with better prognosis
and low risk of evolution to AIDS. The results suggest that HGV infection
may slow disease progression, directly or indirectly.
Prevalencia de infección por virus de hepatitis G en una cohorte
de pacientes hemofílicos HIV+.
RESUMEN
Se evaluó la prevalencia
de infección por el virus de hepatitis G (HGV) en pacientes hemofílicos
infectados por el virus de hepatitis C (HCV) y coinfectados por el virus
de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (HIV-1) determinándose
la viremia por HGV en plasma por la reacción en cadena de la
polimerasa (PCR). La prevalencia global de infección por HGV
fue de 13,51%. La edad fue el único parámetro que evidenció
diferencias significativas entre el grupo HGV+ y HGV-, siendo más
frecuente la comprobación de viremia por HGV entre los pacientes
más jóvenes. No se observó correlación entre
viremia por HGV y carga viral para HIV, niveles de linfocitos CD4+ o
con tratamiento antirretroviral de alta eficacia (HAART). Considerando
a los pacientes de buen o mal pronóstico con respecto a la enfermedad
HIV/ SIDA la prevalencia de infección por HGV fue mayor en el
grupo de pacientes con mejor pronóstico y menor riesgo de progresión
a SIDA. La infección por HGV podría influir favorablemente
de manera directa o indirecta en la evolución de la infección
por HIV-1.
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Prophylaxis
in developed and in emerging countries. Haemophilia 2002; 8:183-8.
TUSELL J*, PÉREZ-BIANCO
R.**
*Hospital Vall d'Hebron,
Barcelona, España; **Academia Nacional de Medicina, Buenos Aires,
Argentina.
SUMMARY
The significant progress
made in recent years in the safety and efficacy of both plasma-derived
and recombinant factor concentrates has allowed treatment programs to
be developed that go beyond the simply curative or the treatment of
the consequences of the disease (episodic or on-demand treatment), enabling
the criteria of preventative medicine to be applied to congenital bleeding
disorders. The aim of these programs is to achieve constant, minimum
levels of factor in patients above 1 or 2%, thereby converting severe
haemophilia into moderate haemophilia.
Profilaxis en países desarrollados y emergentes.
RESUMEN
Los adelantos de los últimos
años en la seguridad y eficacia de los concentrados antihemofílicos,
tanto los derivados del plasma como los recombinantes, han permitido
que los programas de tratamiento se desarrollaran más allá
de la simple curación o el tratamiento de las consecuencias de
la enfermedad (tratamiento episódico o a demanda), dando lugar
a la aplicación del criterio preventivo en las alteraciones congénitas
del sangrado. El objetivo de dichos programas es lograr que los pacientes
tengan niveles de factor mínimos y constantes por encima del
1 o 2%, transformando la hemofilia severa en moderada.
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Enhanced
uptake of antisense oligonucleotides using cationic liposomes and the
apoptotic effect of idarubicin in K-562 cell line. Leuk Res 2002;
26:669-76.
VELLON L, GONZÁLEZ-CID
M, KARARA A, NEBEL MDE C, CUELLO MT, LARRIPA I.
Departamento de Genética,
Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex",
Academia Nacional de Medicina.
SUMMARY
We have evaluated the apoptotic
and DNA damaging activity of Idarubicin (IDA) on K-562 cells alone and
following the uptake of modified antisense-oligodeoxynucleotides (AS-ODNs)
targeting b3a2 mRNA of bcr/abl hybrid gene, after treatment with AS-ODNs/DCChol-DOPE
(liposomes) complexes. The uptake of FITC-labeled oligonucleotide-liposomes
complexes (FITC-ODNs/DCChol-DOPE) was analyzed by flow cytometry and
fluorescence microscopy. Both techniques indicated cytoplasmic accumulation
of labeled liposome complexes following 24h of exposure. In absence
of liposomes, AS-ODNs uptake was minimal. Pre-treatment of cells with
AS-ODNs/DCChol-DOPE increased the capability of IDA to induce apoptosis
as determined by morphology and the comet assay. In contrast, the use
of a non-sense oligodeoxynucleotide conjugated with liposomes, in the
presence of IDA, did not increase K-562 cell apoptosis. Nevertheless,
DNA damage in IDA treated cells was not related to ODNs/liposomes pre-treatment,
as determined by the comet assay. Our data suggests that DCChol-DOPE
increases the uptake of ODNs in K-562 cells, and these modified AS-ODNs
increase IDA induced apoptosis by decreasing p210(bcr/abl) levels in
K-562 cells.
Aumento de la toma de los oligonucléotidos antisentido usando
liposomas catiónicos y del efecto apoptótico de idarubicina
en la línea K562.
RESUMEN
Se evaluó la apoptosis
y la actividad de daño al ADN de la idarubicina (IDA) en la línea
K-562 sola y después del agregado de oligonucleótidos
antisentido modificados (AS-ODNs) dirigidos contra el mRNA b3a2 del
gen híbrido bcr/abl, después del tratamiento con complejos
AS-ODNs/DCChol-Dope (liposomas). El uptake de los oligonucleótidos
marcador con FICT (FICT-ODNs/DCChol-DOPE) fue analizado por Citometría
de flujo y Microscopia de fluorescencia. Ambas técnicas indicaban
acumulación citoplasmática de complejos liposomas-oligonucléotidos
marcados después de 24 horas de exposición. En ausencia
de liposomas, el uptake de AS-ODNs fue mínimo. El pretratamiento
de las células con AS.ODNs/DCChol-DOPE incrementó la capacidad
de IDA para inducir apoptosis, lo cual fue determinado por morfología
y test del cometa. En contraste, el uso de oligonucleótidos sin
sentido conjugados con liposomas, en presencia de IDA no incrementó
la apoptosis en las células K-562. Sin embargo el daño
en las células tratadas con IDA no se relacionó con el
pretratamiento de ODNs/liposomas, como se determinó por el ensayo
cometa. Nuestros datos sugieren que el DCChol-DOPE incrementa la entrada
de ODNs en las células K-562, y estos nucleótidos (AS-ODNs)
modificados incrementan la apoptosis inducida por IDA por disminución
de los niveles de p210 (bcr/abl) en células K-562.